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成果名称：酪蛋白免疫调节肽制备技术研究与产品开发
申请单位：中国农业大学
成果编号：鉴字[教PP2006] 第004号
鉴定日期：2006年4月14日
学 科：①550.50 食品加工的副产品加工与利用；②550.2025 乳加工技术
第一完成单位：中国农业大学
第一完成人：任发政
通讯地址及邮编：北京海淀区清华东路17号303信箱，100083
电话、传真：01062736344
成果内容摘要：（已超1000字，是否都可以公开？）
一、任务来源：
本项目研究任务来源于北京市教育委员会省部共建重点实验室项目(项目编号GJSYS100190401)及国家科技部"十五" 重大科技专项:"乳制品加工关键技术的研究"(编号2002BA518A-05)子项目。
二、技术原理：
酪蛋白是主要的乳蛋白，富含生物活性序列，免疫调节肽以非活性形式隐藏于酪蛋白的氨基酸序列中，在适当条件下可以被释放出来，发挥其生理学活性。
本课题研究了制备酪蛋白免疫调节肽的适宜酶类和酶解条件，使酶解产物具有一定免疫调节活性且便于在实际中推广应用，为规模化生产提供科学依据；通过分析酶解产物对小鼠体内和体外的免疫调节活性，为其在保健食品和药品生产中的安全应用提供科学依据。
三、性能指标
研究了酶解干酪素制备酪蛋白免疫调节肽的工艺参数，确定了酶的种类，超滤膜孔径，及获得高活性免疫调节肽的酶解条件。以体外和体内实验测定了酪蛋白多肽的免疫调节功能。主要测定指标有：小鼠脾淋巴细胞增殖活性，脾细胞上清液中IL-2 和IFN-γ生成量及其mRNA的表达，巨噬细胞吞噬活性、一氧化氮（NO）生成量、对Jurkat细胞的杀伤活性，脾细胞表面抗原表达。证实了不同水解度、不同截留分子量范围及不同酶的酶解产物对ConA诱导的小鼠脾T淋巴细胞增殖活性及IL-2生成量的影响不同，且存在一定的剂量效应，活性组分的截留分子量在3 000Da以下。在一定浓度范围内，酶解产物本身对未经丝裂原诱导的小鼠脾淋巴细胞既没有丝裂原效应，也没有细胞毒性效应。酶解产物本身对小鼠腹腔巨噬细胞NO生成量没有影响，但与LPS具有协同作用。不同酶解产物对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性、NO生成量及杀伤效应的影响不同。与生理盐水和胸腺肽处理组相比，酪蛋白酶解产物可以促进小鼠淋巴细胞增殖、IL-2和IFN-γ生成量及其表达，证明酪蛋白多肽具有增强小鼠免疫能力的作用。开发了具有免疫调节活性的酪蛋白多肽饮料。
四、技术的创造性、先进性
采用酶工程技术对蛋白免疫调节肽的制备工艺做了全新改进，确定了制备免疫调节肽的来源广泛的微生物蛋白酶种类，大大降低活性肽的生产成本，使其工业化生产成为可能和现实。采用免疫学方法，通过体外和体内实验，对来源于食品级原料的酪蛋白水解肽进行了免疫调节功能评估，充分证实了其免疫效果，为酪蛋白酶解产物在保健食品工业中的安全应用提供科学依据。与企业合作设计了添加酪蛋白免疫调节肽的乳蛋白多肽饮料，实现了酪蛋白多肽的产业化，且制订了酪蛋白免疫调节多肽乳饮料的企业标准，提高了干酪素附加值，促进牧民增收。
五、技术的成熟程度，适用范围和安全性
本研究以干酪素为原料，获得了便于工业化生产的酪蛋白免疫调节多肽，并证实了其免疫调节效果；可以为免疫调节型保健品的开发提供新型功能性基料，提高我国乳制品的科技含量，实现干酪素增值；已在北京三元乳品有限公司进行了中试生产，建立了生产线，还制定了酪蛋白免疫调节多肽乳饮料的企业标准。
七、推广应用前景与措施
本项目获得的酪蛋白免疫调节肽制备条件，是以我国资源丰富而利用程度相对较低的干酪素作为原料，并找到了适合的来源广泛、成本较低的微生物蛋白酶，该项目的推广应用，不仅可以大大提高干酪素增值，还可以提高我国乳制品科技含量，丰富产品种类，为免疫调节型保健品的开发提供新型功能性基料，具有巨大的经济效益和社会效益。
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