成果名称:食物源SARS病毒基因的快速检测技术
申请单位:中国农业大学食品科学与营养工程学院
成果编号:鉴字[教SW2003] 第 011 号
鉴定日期:2003年5月27日
学 科:医药卫生
成果简介:
本项目利用RT- Nested PCR技术,针对SARS病毒RNA序列保守区域设计并筛选出实用、可靠、灵敏度高、忠实性好的引物,对食品中的所有RNA进行扩增,并对扩增产物进行分析检测,从而确定食品中是否被SARS病毒污染。利用改进的RNA提取技术分别对植物源和动物源食品进行RNA的提取,免除了病毒的分离和富集过程,减少了检测的时间和操作的危险性。并设置了内参照基因以对检测过程进行质量控制,通过内参照基因、阴性对照和阳性对照保证了检测体系的质量。通过研究发现建立的巢式RT-PCR检测技术体系可以检测到10-6μg/μl的RNA量水平,并且,通过限制性酶切分析,表明RT-PCR扩增产物具有很好的忠实性;提取的RNA质量通过内参照基因的RT-PCR扩增,均获得了预期的结果,表明建立的RNA提取方法可以满足要求,建立的质量控制措施可以对检测过程进行监控。研究结果表明建立的食物源SARS病毒基因的快速检测技术体系达到了该项目预期的目标。